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Phusion100 高保真DNA聚合酶

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Phusion100 高保真 DNA 聚合酶是一款专为高效 PCR 扩增而精心设计的酶类产品。在保真度方面表现卓越,其错配率相较于 Taq 聚合酶降低了 100 倍,相较于 Pfu 聚合酶也低了 12 倍。这一显著优势使其成为克隆以及其他对保真度要求极高的应用场景的理想之选。
与其他 DNA 聚合酶相比,Phusion100 DNA 聚合酶展现出多方面的性能优势。它具备出色的稳定性,即便在存在 PCR 抑制剂的复杂环境下,依然能够稳定发挥作用。同时,该酶还能有效缩短实验方案的耗时,只需使用更低的酶量,就能实现更高的产物产率,为科研工作者节省成本和时间。

Phusion100 热启动高保真 DNA 聚合酶采用了独特的热启动技术。其原理在于,Phusion100 DNA 聚合酶与一种特异性配体呈可逆性结合,这种配体能够在室温条件下对 DNA 聚合酶的活性产生抑制作用。这就确保了在进行扩增反应之前,不会产生非特异性产物,避免了实验结果的干扰。

此外,该配体还能够抑制聚合酶的 3′→5′核酸外切酶活性,从而防止在反应构建过程中引物和模板 DNA 发生降解,保证了反应体系的完整性和稳定性。当反应体系处于促进聚合酶活性的温度时,配体便会从聚合酶上释放出来,使聚合酶完全活化。由于 Phusion100 热启动 DNA 聚合酶在较高温度下能够立即重新激活,因此在 PCR 实验方案中无需设置单独的激活步骤,进一步简化了实验流程。


主要特点


  • 室温反应构建:允许在室温条件下进行反应体系的构建,操作更加便捷灵活,减少了对实验环境的苛刻要求。

  • 杜绝非特异性扩增与引物降解:在反应构建期间,有效避免非特异性扩增和引物降解的问题,确保实验结果的准确性和可靠性。

  • 零时重新激活:借助独特的热启动技术,实现聚合酶的零时重新激活,提高了实验效率。

  • 高保真性能:保真度高达 Taq 聚合酶的 100 倍,能够精确复制 DNA 序列,减少错配的发生。

  • 快速 PCR 扩增:显著缩短了延伸时间,使得 PCR 反应速度大幅加快,每千碱基只需 15 - 30 秒。

  • 反应稳定性强:反应过程稳定,几乎无需进行复杂的优化操作,降低了实验的难度和不确定性。

  • 低酶量高产率:仅需使用极低的酶量,就能生成更多的产物,有效降低了实验成本。

  • 便捷凝胶上样:提供 Green 缓冲液,样品可直接上样至凝胶,简化了后续的分析步骤。

应用场景


  • 高保真 PCR:凭借其卓越的保真度,能够准确扩增 DNA 片段,满足高保真 PCR 的需求。

  • 高通量测序:为高通量测序提供高质量的 DNA 模板,确保测序结果的准确性和可靠性。

  • 难扩增模板处理:对于高 GC 含量等难以扩增的模板,也能实现高效扩增。

  • 测序模板获取:可用于获得高质量的测序模板,为后续的测序工作奠定基础。

  • 多重 PCR:在多重 PCR 反应中,能够同时扩增多个目标片段,提高实验效率。

  • 长片段 PCR:适用于长片段 DNA 的扩增,满足对长序列研究的需求。

  • 克隆实验:高保真性能使其成为克隆实验的理想选择,确保克隆结果的准确性。

  • 诱变研究:在诱变实验中,能够精确复制 DNA 序列,为诱变研究提供可靠的工具。

  • 微阵列分析:为微阵列分析提供高质量的 DNA 样本,保证分析结果的准确性。

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